微生物培養(yǎng)基是供微生物生長(zhǎng)、繁殖、代謝的混合養(yǎng)料。微生物培養(yǎng)基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)素以及水分等。另外，培養(yǎng)基還應(yīng)具有適宜的pH值、一定的緩沖能力、一定的氧化還原電位及合適的滲透壓。生物指示劑培養(yǎng)器品牌下面我們來(lái)介紹一下基本微生物培養(yǎng)基的配制方法。

微生物培養(yǎng)基的配制

溶化：

一般應(yīng)放在玻璃器皿或搪瓷齊內(nèi).加入蒸餾水,隔水加熱以促其溶解,加熱時(shí)應(yīng)經(jīng)常攪拌,防止焦結(jié),待其溶解后補(bǔ)足水分.

在使用干燥培養(yǎng)基時(shí),先將蒸餾水按定量加入容器中,然后稱取一定量培養(yǎng)基干粉放入水中,靜置1015min,攪拌,振蕩,或延長(zhǎng)時(shí)間以促進(jìn)溶解,一般不要熱,必要時(shí)加熱,但時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),溫度不宜過(guò)高,避免某些營(yíng)養(yǎng)成分被破壞.

校正酸堿度（調(diào)節(jié)pH）：

培養(yǎng)基必須有適當(dāng)?shù)膒H.因此測(cè)定pH是培養(yǎng)基配制過(guò)程中的重要步驟之一,測(cè)定pH的標(biāo)準(zhǔn)溫度為25士2℃.調(diào)節(jié)pH可用無(wú)菌的1mol/l氫氧化鈉溶液或10%碳酸鈉溶液、1mol/l鹽酸溶液.當(dāng)調(diào)節(jié)緩沖液的pH時(shí),宜用6mol/l磷酸或10mol/l氫氧化鉀溶液.生物指示劑培養(yǎng)器品牌滅菌后的pH會(huì)比滅菌前的pH升高或降低,一般高壓滅菌前培養(yǎng)基的pH會(huì)比最終pH調(diào)高0.2左右,滅菌后基本合適.因此對(duì)培養(yǎng)基、緩沖液、試劑在滅菌前后的pH均進(jìn)行測(cè)定,并記下每次pH的測(cè)定結(jié)果,有助于積累數(shù)據(jù)考察每種培養(yǎng)基、緩沖液、試劑對(duì)滅菌程序的耐受性,從而指導(dǎo)滅菌前pH的調(diào)節(jié).干燥培養(yǎng)基一般已校正過(guò)pH,用時(shí)也必須再驗(yàn)證.測(cè)定時(shí),一般用指示劑滴入培養(yǎng)基觀察其顏色的變化,或用pH計(jì)校正,如與所需pH不符,可用以上的酸或堿液加以校正.調(diào)整pH后要加熱過(guò)濾,使培養(yǎng)基澄清.

培養(yǎng)基的滅菌：

培養(yǎng)基的滅菌多采用高壓蒸汽滅菌,各種培養(yǎng)基的滅菌時(shí)間和壓力,按其成分不同而定.普通培養(yǎng)基采用121℃、103.42kPa滅菌15min,但容器和裝量較大時(shí),應(yīng)延長(zhǎng)至20min.含糖培養(yǎng)基115℃、68.85kPa滅菌30min.含糖、血清、雞蛋等培養(yǎng)基可用流動(dòng)蒸汽及血清凝固器80100℃、30min,連續(xù)3d,間歇滅菌.血清或組織液,采用低熱5658水浴1h,連續(xù)56d滅菌,一些遇高溫即被破壞的物質(zhì)如尿素、腹水等,可用細(xì)菌過(guò)濾器,過(guò)濾除菌.高壓滅菌應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程執(zhí)行,必須逐漸加熱,徹底排除滅菌器內(nèi)的空氣,再逐漸升壓保持預(yù)定的壓力和時(shí)間,達(dá)到全部殺滅微生物.以上的滅菌時(shí)間和溫度要經(jīng)過(guò)驗(yàn)證確認(rèn),如不同類(lèi)型培養(yǎng)基混合一起滅菌時(shí)宜采用115℃、68.85kPa滅菌30min為好。