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2020-10-26
2020-10-20
干式恒溫器雙模塊NAI-GSHWQ2采用干式恒溫加熱器微電腦控制的恒溫金屬浴裝置,利于高純鋁材料做為導(dǎo)熱介質(zhì),以替代傳統(tǒng)的水浴裝置,具有控溫精度高,制樣平行性好等優(yōu)點(diǎn),可廣泛應(yīng)用于樣品的保存和反應(yīng)、DNA擴(kuò)增和電泳的預(yù)變性、血清凝固等。
應(yīng)用范圍 Application range
廣泛應(yīng)用于酶制劑反應(yīng),血清滅活試驗(yàn),Rh血樣研究,交叉配血,以及膽固醇的鑒定檢測(cè)等多個(gè)領(lǐng)域
1.試驗(yàn)名稱 常以項(xiàng)目的英文縮寫來(lái)設(shè)置,如總蛋白設(shè)置為TP,白蛋白設(shè)置為ALB等。
2.方法類型 生化分析儀常用的方法有終點(diǎn)法、連續(xù)監(jiān)測(cè)法、比濁法等,根據(jù)被檢物質(zhì)的檢測(cè)原理等選擇其中一種分析方法。
2.1終點(diǎn)法 又稱為平衡法,干式恒溫加熱器是基于反應(yīng)達(dá)到平衡時(shí)反應(yīng)產(chǎn)物的吸收光譜特征及其對(duì)光吸收強(qiáng)度的大小對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量分析的一類方法,有一點(diǎn)終點(diǎn)法和兩點(diǎn)終點(diǎn)法兩類。一點(diǎn)終點(diǎn)法的特點(diǎn)是使用一種或兩種試劑,當(dāng)待測(cè)物與試劑反應(yīng)達(dá)到終點(diǎn)時(shí),測(cè)定混合溶液的吸光度來(lái)計(jì)算待測(cè)物的濃度,該法常用的有總蛋白雙縮脲法、白蛋白溴甲酚綠法、葡萄糖氧化酶法等,手工操作的大多數(shù)方法都是一點(diǎn)終點(diǎn)法。兩點(diǎn)終點(diǎn)法也稱固定時(shí)間法,如果是單試劑分析,當(dāng)測(cè)定波長(zhǎng)同干擾物質(zhì)的吸收光譜有重疊時(shí),通過選用兩點(diǎn)終點(diǎn)法可消除樣品空白引起的干擾,其分析過程是在樣品與試劑混合后經(jīng)過一段延滯期讀取一個(gè)點(diǎn)A1,一定時(shí)間后再讀取A2,然后比較標(biāo)準(zhǔn)和測(cè)定的ΔA(ΔA=A2-A1)值,求得待測(cè)物的濃度。肌酐苦味酸法就是一個(gè)典型的單試劑兩點(diǎn)法的例子。如果是雙試劑分析,選用二點(diǎn)終點(diǎn)分析法除了可消除樣品空白引起的干擾外,還可消除內(nèi)源性干擾物質(zhì)的干擾,其分析過程是加入試劑1后讀取A1,加入試劑2后讀取A2,A1相當(dāng)于讀出樣品空白值,A2才是實(shí)際呈色反應(yīng),然后比較標(biāo)準(zhǔn)和測(cè)定的ΔA(ΔA=A2-A1)值,求得待測(cè)物的濃度。為了提高終點(diǎn)法檢測(cè)的準(zhǔn)確性,選擇該法時(shí)應(yīng)設(shè)置終點(diǎn)法零點(diǎn)讀數(shù)、樣品空白等兩個(gè)分析參數(shù),干式恒溫加熱器前者是在反應(yīng)前即開始讀數(shù),可以扣除反應(yīng)前試劑和樣品混合液的空白讀數(shù);后者是樣品加空白試劑所得到的吸光度,反應(yīng)需要占用一個(gè)比色杯。 http://www.hg70070.com
2.2連續(xù)監(jiān)測(cè)法 干式恒溫加熱器 又稱動(dòng)態(tài)分析法、速率法等,基本原理是在酶促反應(yīng)的最適條件下,用物理、化學(xué)或酶促反應(yīng)的分析方法,在反應(yīng)速度恒定期(零級(jí)反應(yīng)期)內(nèi)連續(xù)觀察和記錄一定反應(yīng)時(shí)間內(nèi)底物或產(chǎn)物量的變化,以單位時(shí)間酶反應(yīng)初速度計(jì)算出酶活力的大小和代謝物的濃度。具體方法有兩點(diǎn)速率法和多點(diǎn)速率法:兩點(diǎn)速率法是通過觀察在零級(jí)反應(yīng)期內(nèi)兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)的吸光度,用兩個(gè)點(diǎn)的吸光度的差值(ΔA)除以時(shí)間(分),計(jì)算出每分鐘的吸光度變化值;多點(diǎn)速率法是在零級(jí)反應(yīng)期內(nèi)每隔一定時(shí)間(2-30s)進(jìn)行一次監(jiān)測(cè),連續(xù)監(jiān)測(cè)多次,求出單位時(shí)間內(nèi)的反應(yīng)速度,這種方法又可分為最小二乘法、多點(diǎn)δ法、回歸法、帶速率時(shí)間法等。該法具有明顯的優(yōu)點(diǎn)就是大大提高了分析速度和準(zhǔn)確性,主要適用于酶活性及其代謝產(chǎn)物的測(cè)定。在連續(xù)監(jiān)測(cè)法過程中,即使不加樣品,試劑中的底物也會(huì)自動(dòng)降解得到一個(gè)結(jié)果,因此應(yīng)設(shè)置試劑空白速率,不同批號(hào)試劑的試劑空白速率不一樣,其值為以水代樣品測(cè)得的項(xiàng)目結(jié)果,樣品測(cè)定結(jié)果應(yīng)扣除試劑空白速率的數(shù)值。
2.3比濁法 干式恒溫加熱器自動(dòng)生化分析儀一般只能做透射免疫比濁分析,當(dāng)光線通過一定體積的含免疫復(fù)合物的溶液時(shí),由于溶液中存在的抗原-抗體復(fù)合物粒子對(duì)光線的反射和吸收,引起透射光的減少,測(cè)定的光通量和抗原抗體復(fù)合物的量成反比。它常用于終點(diǎn)法測(cè)定,目前主要用于血清特種蛋白的檢測(cè),如載脂蛋白、微量蛋白、急性時(shí)相反應(yīng)蛋白、免疫球蛋白以及某些藥物監(jiān)測(cè)等。但是如果樣品中待測(cè)抗原濃度過高,抗原與抗體形成的免疫復(fù)合物分子將會(huì)變小,而且易發(fā)生解離,使?jié)岫确炊陆,因此免疫比濁分析過程中必須設(shè)置前區(qū)檢查,比較分析過程中后兩個(gè)讀數(shù)點(diǎn)的差別,如果后一點(diǎn)比前一點(diǎn)的吸光度低,則表示抗原已過剩,應(yīng)將樣品稀釋后重測(cè)。
3.反應(yīng)溫度 自動(dòng)干式恒溫加熱器生化分析儀通過溫度控制系統(tǒng)保持溫度恒定,以保證反應(yīng)的正常進(jìn)行,其保持恒溫的方式有三種:干式恒溫器加熱、水浴式循環(huán)加熱、恒溫器循環(huán)間接加熱。恒溫控制器可以對(duì)25℃、30℃、37℃三種溫度進(jìn)行恒溫,根據(jù)需要可以任意選擇,半自動(dòng)生化分析儀恒溫器屬于這種。全自動(dòng)生化分析儀的溫度控制器一般只能控制37℃一種溫度,少數(shù)也可以控制30℃和37℃兩種溫度。
4.反應(yīng)波長(zhǎng) 當(dāng)測(cè)定體系中只有一種組分或混合溶液中待測(cè)組分的吸收峰與其他共存物質(zhì)的吸收波長(zhǎng)無(wú)重疊時(shí),可選用單波長(zhǎng),如果待測(cè)物質(zhì)有幾個(gè)吸收峰,可選用吸光度最大的一個(gè)波長(zhǎng),或者選擇在吸收峰處吸光度隨波長(zhǎng)變化較小的某個(gè)波長(zhǎng)。當(dāng)被檢溶液混濁或存在較多的干擾物質(zhì)時(shí),測(cè)定過程中會(huì)出現(xiàn)光散射和非特異性光吸收,從而影響測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性,此時(shí)可用雙波長(zhǎng)甚至多波長(zhǎng)測(cè)定,以提高測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性,而在實(shí)際應(yīng)用中選擇輔助波長(zhǎng)主要用于消除脂血、溶血、黃疸的干擾。由于脂質(zhì)、血紅蛋白、膽紅素在較寬的波長(zhǎng)范圍內(nèi)有較強(qiáng)的光吸收,常常同測(cè)定波長(zhǎng)有重疊,此時(shí)測(cè)得的吸光度包含待測(cè)物質(zhì)的吸光度和干擾物質(zhì)的吸光度,因此必須選用合適的輔助波長(zhǎng)來(lái)消除干擾物質(zhì)的吸光度。輔助波長(zhǎng)的設(shè)置原則是根據(jù)測(cè)定波長(zhǎng)選擇輔助波長(zhǎng),要求干擾物質(zhì)在測(cè)定波長(zhǎng)同輔助波長(zhǎng)有相同的吸光度。
5.反應(yīng)方向 有正向反應(yīng)和負(fù)向反應(yīng)兩種,反應(yīng)過程中吸光度增加為正向反應(yīng),吸光度下降為負(fù)向反應(yīng)。
6.樣品量與試劑量 樣品與試劑量的確定一般按照試劑說(shuō)明書上的比例,并結(jié)合儀器的特性進(jìn)行設(shè)置,亦可根據(jù)手工法按比例縮減或重新設(shè)計(jì),但要考慮到檢測(cè)靈敏度、線性范圍,盡可能將樣品稀釋倍數(shù)大些,以降低樣品中其他成分的影響。在樣品與試劑量的設(shè)置過程中主要應(yīng)注意以下幾個(gè)方面:①稀釋水量,添加樣品稀釋水的是為了洗出粘附在采樣針內(nèi)壁上的微量血清,減少加樣誤差,添加試劑稀釋水是為了避免試劑間的交叉污染,兩種稀釋水的量應(yīng)在復(fù)溶試劑時(shí)按比例扣除。