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2020-10-26
2020-10-20
干式恒溫器在報(bào)告中首先按照檢測(cè)對(duì)象對(duì)食品轉(zhuǎn)基因方法進(jìn)行了分類,一種是核酸檢測(cè),其主要采用普通PCR、實(shí)時(shí)熒光PCR、巢氏PCR、競(jìng)爭(zhēng)性PCR、基因芯片技術(shù);另一種是蛋白質(zhì)檢測(cè),主要干式恒溫器采用的是ELISA、免疫試紙條、干式恒溫器記技術(shù)。石磊題道,國(guó)外許多政府檢測(cè)機(jī)構(gòu)都在大量使用快速檢測(cè)方法,尤其是ATP法、免疫法、阻抗法和顯色培養(yǎng)基法,這些快速檢測(cè)方法在國(guó)外應(yīng)用相當(dāng)成功。國(guó)內(nèi)的許多政府檢測(cè)機(jī)構(gòu)也都已經(jīng)在使用或干式恒溫器正在考慮使用國(guó)外先進(jìn)的快速檢測(cè)技術(shù)。石磊說(shuō),從長(zhǎng)遠(yuǎn)發(fā)展趨勢(shì)來(lái)說(shuō),快速方法是轉(zhuǎn)干式恒溫器基因檢測(cè)的大方向。
報(bào)告中介紹了目前常用的轉(zhuǎn)基因檢測(cè)方法,如膠干式恒溫器體金免疫層析檢測(cè)條、PCR—聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)、熒光PCR技術(shù)等。他說(shuō),熒光定量PCR(qPCR)技術(shù)是目前主流的分子檢測(cè)技術(shù),相關(guān)產(chǎn)品占據(jù)全球分子診斷市場(chǎng)的一半。然而這種技術(shù) 由于核酸檢測(cè)過(guò)程復(fù)雜、實(shí)現(xiàn)核酸擴(kuò)增信干式恒溫器號(hào)檢測(cè)設(shè)備價(jià)格高、對(duì)實(shí)驗(yàn)室硬件條件要求高等問(wèn)題,只局限于高端市場(chǎng),普及推廣困難,基層醫(yī)療和檢測(cè)機(jī)構(gòu)需求得不到滿足。
基于此種現(xiàn)狀,石磊及其團(tuán)隊(duì)開(kāi)發(fā)了新型恒溫?zé)晒夂怂釘U(kuò)增分子檢測(cè)平臺(tái)。據(jù)該平臺(tái)的反應(yīng)原理是一種新型的等溫?cái)U(kuò)增技術(shù),即等溫多自配引發(fā)擴(kuò)應(yīng)體系是具有鏈置換特性的DNA聚合酶、dNTP、適宜的緩沖液和模板DNA,能夠識(shí)別靶DNA7個(gè)特異序列的6條引物。他說(shuō),該方法特異性強(qiáng),6條引物對(duì)靶序列的7個(gè)特異序列區(qū)的識(shí)別保證了IMSA擴(kuò)增的高特異性;且等溫高效,IMSA在等溫條件下擴(kuò)增,不會(huì)因?yàn)闇囟雀淖兌斐蓵r(shí)間的損失,而且受非靶序列的影響小,與PCR相比,其檢測(cè)極限更小,僅為幾個(gè)拷貝;谶@些優(yōu)點(diǎn),IMSA在1小時(shí)可完成檢測(cè),核酸染料后,肉眼就可觀察結(jié)果且反應(yīng)不需PCR儀和特殊試劑。已經(jīng)成功產(chǎn)業(yè)化。目前,一臺(tái)恒溫?zé)晒鈾z測(cè)儀、搭配一臺(tái)金屬浴、一臺(tái)混勻器、一臺(tái)小型離心機(jī)及移液器和檢測(cè)試劑盒即可成為一套可移動(dòng)的轉(zhuǎn)基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室。